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AQP1慢病毒载体成功转染心肌细胞后加重体外循环后心肌细胞水肿

AQP1慢病毒载体成功转染心肌细胞后加重体外循环后心肌细胞水肿

作     者:闫玉梅 丁芳宝 梅举 孙锟 YAN Yu-mei;DING Fang-bao;MEI Ju;SUN Kun

作者机构:上海交通大学医学院附属新华医院心胸外科200092 上海交通大学医学院附属新华医院儿内科200092 

基  金:国家自然科学基金(30872558) 

出 版 物:《中华胸心血管外科杂志》 (Chinese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery)

年 卷 期:2012年第28卷第9期

页      码:540-543页

摘      要:目的探讨水通道蛋白-1(AQP1)慢病毒载体可否成功转染心肌细胞,转染成功的心肌细胞在体外循环结束后,不同时点AQP1表达变化及与心肌水肿的关系。方法健康成年羊36只,分为空载体组和AQP1慢病毒转染组。根据羊AQP1mRNA全基因设计酶切引物,克隆到慢病毒表达载体中,与其它包装载体共转染293T细胞产生病毒载体并测定病毒滴度。体外循环期间将空载体或AQP1病毒悬液注射入左心室心肌组织,体外循环结束后不同时间点(2、6、12、24、48、72h)取材,每个时间点3只。应用reahimePCR、WesternBlot、ELASE、流式细胞仪(FACS)和干湿重法等检测AQP1慢病毒载体是否成功转染心肌细胞,成功转染体外循环后不同时间点AQP1表达变化和心肌水肿程度。结果成功构建AQP1慢病毒载体并转染心肌细胞,体外循环后不同时间点AQP1表达变化趋势和心肌水肿程度与空载体组心肌表达变化趋势一致,但程度较高,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论AQP1慢病毒载体可成功转染心肌细胞,AQP1高表达的心肌组织在体外循环后不同时间点AQP1的表达和水肿程度变化趋势不变,但均较空载体转染组程度高。AQP1表达量与心肌水肿程度正相关。

主 题 词:水通道蛋白1 慢病毒感染 转染 心肺转流术 肌细胞,心脏水肿 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/cma.j.issn.1001-4497.2012.09.009

馆 藏 号:203144170...

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