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正交优化乙醛脱氢酶2基因多态性PCR体系

正交优化乙醛脱氢酶2基因多态性PCR体系

作     者:吴珂 蔡泓敏 刘震 赵冠人 冯端浩 WU Ke;CAI Hong-min;LIU Zhen;ZHAO Guan-ren;FENG Duan-hao

作者机构:解放军第309医院药剂科北京100091 

出 版 物:《中国药物警戒》 (Chinese Journal of Pharmacovigilance)

年 卷 期:2013年第10卷第11期

页      码:643-646页

摘      要:目的建立通用的ALDH2基因PCR反应体系,筛选出各反应因素的最佳水平。方法采用正交设计L16(45)在4个水平5个因素(Taq酶、引物、Mg2+、dNTP和模板DNA)对ALDH2基因PCR反应体系进行实验,两次结果分别用统计软件MINITAB进行分析,利用梯度PCR确定引物最佳退火温度。结果 ALDH2基因PCR反应的最佳反应条件为:为25 L体系中包含:Mg2+(25 mM)2.5 L、dNTPs(2.5 mM)2.0 L、引物上游和引物下游各(2.5 M)3.0 L、模板DNA 3.0μL、10×PCR buffer 2.5 L、Taq酶1.5U,退火温度为60℃。结论这一通用PCR反应条件的建立为实现ALDH2基因多态性检测建立了基础。

主 题 词:ALDH2 基因多态性 正交设计 PCR体系 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D O I:10.19803/j.1672-8629.2013.11.002

馆 藏 号:203144219...

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