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多重PCR检测蜡样芽胞杆菌的研究

多重PCR检测蜡样芽胞杆菌的研究

作     者:刘秀峰 黄铭珊 潘珍瑜 林萍 强华 LIU Xiu-feng;HUANG Ming-shan;PAN Zheng-yu;LIN Ping;QIAN Hua

作者机构:福州市疾病预防控制中心福建医科大学教学基地福建福州350004 福建卫生职业技术学院福建福州350101 福建医科大学福建福州350001 

基  金:福州市科技计划项目(No.2014-s-145) 

出 版 物:《中国热带医学》 (China Tropical Medicine)

年 卷 期:2016年第16卷第3期

页      码:221-225页

摘      要:目的建立多重PCR方法检测蜡样芽胞杆菌。方法根据蜡样芽胞杆菌(***)的hbl A、hbl C、nhe A、nhe B、cyt K、cer、ent FM、bce T基因和苏云金芽胞杆菌(***)的cry基因设计引物,优化反应条件。应用单一引物PCR和国标法对多重PCR反应结果进行确认。结果蜡样芽胞杆菌溶血性基因hbl A和hbl C检出率为57.5%和25.0%,非溶血性基因nhe A、nhe B检出率分别为75.0%和80.0%,细胞毒素cyt K基因检出率为37.5%。肠毒素ent FM和bce T检出率分别为28.7%和18.7%。蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌cer基因检出率分别为97.5%和100.0%,cry基因检出率为分别为0.0%和100.0%。cer基因和cry基因同时检测,条带区分清晰,可作为蜡样芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌快速鉴别的首选方法。结论三重PCR结果非常好,三对引物所扩增出的DNA条带明显区分开,电泳条带清晰,敏感度高,特异性强。单重PCR和三重PCR检测结果没有显著性差异。

主 题 词:蜡样芽胞杆菌 苏云金芽胞杆菌 多重PCR 毒力基因 腹泻 

学科分类:1004[医学-公共卫生预防医学类] 100403[100403] 10[医学] 

D O I:10.13604/j.cnki.46-1064/r.2016.03.06

馆 藏 号:203144329...

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