新生昆明小鼠胰腺巢蛋白阳性细胞的自然分化

作     者：叶健 何少健 刘琼东 陈维平 莫似恩 袁路 胡利霞 Ye Jian;He Shao-jian;Liu Qiong-dong;Chen Wei-ping;Mo Si-en;Yuan Lu;Hu Li-xia

作者机构：广西壮族自治区人口与计划生育研究中心广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学组织学与胚胎学教研室广西壮族自治区南宁市530021 

基　　金：广西科技厅资助项目(桂科青0229009 桂科攻0592007-1G 桂科自0832157) 广西计划生育委员会科研课题(桂人口计生研0502)~~ 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2009年第13卷第14期

页      码：2680-2684页

摘      要：背景:胰腺干细胞在常规培养条件下易于分化,难以获得足够数量的种子细胞。目的:探讨体外培养条件下小鼠胰腺内、外分泌部的巢蛋白阳性细胞的分化情况。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-08/2007-08在广西医科大学基础医学院中心实验室完成。材料:SPF级新生昆明系小鼠25只,由广西医科大学实验动物中心提供。方法:以Ⅳ型胶原酶消化小鼠胰腺组织,采用Percoll不连续密度梯度法分离单个细胞混悬液,分别从第1界面(磷酸盐缓冲液/1.068g/L Percoll液)、第2界面(1.068g/L Percoll液/1.096g/L Percoll液)、第3界面(1.096g/L Percoll液/1.118g/L Percoll液)收集细胞,添加角质细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的低糖DMEM培养基进行体外连续培养。主要观察指标:双硫腙染色判断各界面细胞的来源,免疫组织化学检测各界面细胞巢蛋白、胰十二指肠同源盒基因蛋白1、角蛋白19的表达。结果:从第1,2界面收集到的细胞80%～90%双硫腙染色后胞质呈铁红色,表明主要来源于胰腺的内分泌部;从第3界面收集到的细胞双硫腙染色后胞质不染色,表明来源于胰腺的外分泌部。从胰腺的内、外分泌部均可分离出大、圆、单个核的细胞,巢蛋白染色呈阳性表达。随着体外培养时间的延长,来源于胰腺内分泌部的巢蛋白阳性细胞形态保持不变,呈集落样生长,表达胰十二指肠同源盒基因蛋白1,有向胰腺内分泌部β-细胞分化的趋势;来源于胰腺外分泌部的巢蛋白阳性细胞呈铺路石样形态,表达细胞角蛋白19,出现向导管上皮细胞分化的趋势。结论:新生昆明小鼠胰腺的内分泌部和外分泌部均存在巢蛋白阳性的细胞,前者具有分化为β-细胞的能力,后者具有分化为导管上皮细胞的能力。

主 题 词：胰腺 巢蛋白 分化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 0403[0403] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 1010[医学-医学技术类] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-8225.2009.14.014

馆 藏 号：203144934...