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抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体特异性定性PCR检测方法的建立及其标准化

抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体特异性定性PCR检测方法的建立及其标准化

作     者:肖芳 李允静 武玉花 李俊 高鸿飞 翟杉杉 吴刚 梁晋刚 XIAO Fang;LI Yun-jing;WU Yuhua;LI Jun;GAO Hong-fei;ZHAI Shan-shan;WU Gang;LIANG Jin-gang

作者机构:中国农业科学院油料作物研究所/农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室/农业农村部植物生态环境安全监督检验测试中心(武汉)/农业农村部农业转基因生物溯源重点实验室湖北武汉430062 农业农村部科技发展中心北京100176 

基  金:农业生物育种重大项目(2022ZD04019) 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASYIP-2021-OCRI) 

出 版 物:《中国油料作物学报》 (Chinese Journal of Oil Crop Sciences)

年 卷 期:2024年第46卷第5期

页      码:1148-1156页

摘      要:抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5已经批准获得我国进口用作加工原料的安全证书,含有外源HaHB4基因和bar标记基因。本研究根据抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体5′端和3′端插入位点旁侧序列信息,设计19对引物,结合罗萨里奥农业生物技术学院公司的1对引物,针对20对引物组合利用定性PCR技术进行引物特异性筛选,结果显示5′端的14号引物特异性良好,优化后获得最佳反应体系和反应程序;经测试,该引物特异性好、稳定性高,检出限达0.1%,扩增片段大小248 bp。经8家有资质实验室对本方法的特异性、检出限、重复性和再现性进行验证,各项参数均达到国家标准要求。本研究成功建立了抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体定性PCR检测方法,为IND-ØØ41Ø-5转化体在国内的安全监管提供技术支撑。

主 题 词:转基因 抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5 转化体特异性 定性PCR 

学科分类:09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录:

D O I:10.19802/j.issn.1007-9084.2023043

馆 藏 号:203145500...

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