半乳糖凝集素-3对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

作     者：封益飞 李涛 李澍 彭吉润 冷希圣 FENG Yi-fei;LI Tao;LI Shu;PENG Ji-run;LENG Xi-sheng

作者机构：北京大学人民医院肝胆外科100044 

基　　金：国家自然科学基金(30872498) 

出 版 物：《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)

年 卷 期：2009年第17卷第9期

页      码：649-652页

摘      要：目的观察半乳糖凝集素-3（galectin-3）表达与肝星状细胞增殖和凋亡的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RTPCR）和Western blot检测大鼠肝星状细胞中galectin-3 mRNA和蛋白的表达；设计合成galectin-3小干扰片段，筛选有效片段构建质粒；转染大鼠肝星状细胞系rHSC-99，并设立对照组和空质粒转染组，RTPCR及Western blot检测RNA干扰后galectin-3的表达。活细胞计数法观察干扰后24、48、72h各组细胞增殖情况；Annexin-V／PI染色，流式细胞仪检测转染72h后各组细胞凋亡情况。组间比较用LSD法t检验进行统计学分析。结果rHSC-99细胞表达galectin-3；成功构建pGCsilencer U6／Neo／GFP／shRNA，并经测序验证正确。转染效率为40％～50％，RT-PCR结果显示：RNA干扰组galectin-3 mRNA表达量较对照组下降了52．4％（F=136．432，P〈0．01），Western blot显示RNA干扰组galectin-3蛋白表达量较对照组下降了69．2％（F=144．842，P〈0．01）。干扰后48h和72h时，galectin-3 RNA干扰组细胞增殖较对照组分别下降38．1％（F=4．425，P=0．010）和37．5％（F=4．415，P=0．018）；干扰72h时，galectin-3 RNA干扰组细胞凋亡率显著高于对照组：早期凋亡率增加155．2％，与对照组比较，F=27．588，P〈0．01；晚期凋亡率增加56．9％，与对照组比较，F=12．798，P〈0．01。结论rHSC-99细胞表达galecitn-3；RNA干扰rHSC-99细胞galectin-3的表达能抑制rHSC99的增殖并促进其凋亡。

主 题 词：肝硬化 肝星状细胞 半乳糖凝集素-3 RNA干扰 细胞凋亡 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2009.09.003

馆 藏 号：203145571...