产鲨烯重组大肠杆菌的构建及发酵研究

作     者：厉元 韩姝 张伟 胡又佳 谢丽萍 LI Yuan;HAN Shu;ZHANG Wei;HU You-jia;XIE Li-ping

作者机构：中国医药工业研究总院上海医药工业研究院上海201203 

出 版 物：《天然产物研究与开发》 (Natural Product Research and Development)

年 卷 期：2024年第36卷第10期

页      码：1721-1731页

摘      要：鲨烯是一种在食品、医药等行业有着广泛应用的三萜类化合物。大肠杆菌被认为是非常有潜力的合成鲨烯的底盘细胞。为提高大肠杆菌内鲨烯的合成水平,以三个诱导型启动子p3-lac、p6-lac、p10-lac强度为水平,以dxs、idi、ispA三个4-磷酸甲基赤藓糖醇途径(methylerythritol 4-phosphate pathway,MEP)的限速酶基因作为因素,进行正交设计,同时引入鲨烯合酶基因,构建了9株重组菌株进行鲨烯发酵实验。通过绿色荧光蛋白表达水平确定了p3-lac启动子强度相对最强,p10-lac相对最弱。通过分析正交发酵实验数据的极差,发现dxs是影响鲨烯产量最主要的因素,其次是ispA,最后是idi,且三个因素最佳水平组合所对应的菌株为1063/DE3,产量达到了450 mg/L。最终获得了一株鲨烯产量相较于出发菌株提高了681倍的产鲨烯重组大肠杆菌菌株,并为提高大肠杆菌内鲨烯产量提供了新的策略。

主 题 词：鲨烯 MEP途径 限速酶 启动子强度 大肠杆菌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.16333/j.1001-6880.2024.10.009

馆 藏 号：203145606...