多重荧光PCR检测水产品致病菌方法的建立与应用研究

作     者：许如苏 林志雄 林彩华 陈冠武 蔡颖 陈其生 杨奇志 

作者机构：汕头出入境检验检疫局广东汕头5150312 广东出入境检验检疫局广东广州510623 罗氏诊断产品有限公司广州办事处广东广州510095 

出 版 物：《广东畜牧兽医科技》 (Guangdong Journal of Animal and Veterinary Science)

年 卷 期：2011年第36卷第4期

页      码：22-27页

摘      要：根据沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157:H7RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度和特异性,建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法对纯菌的检测灵敏度均低于10cfu/PCR反应体系。人工染菌样品经6h增菌,检测的灵敏度可低于10cfu/25g;对48株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;而定量检测批内和批间的变异系数均小于2%。应用本法检测人工染菌样品和进出口水产品样品,结果与SN标准方法检测结果一致。本法可在8h内完成对水产品中上述三种致病菌的定性或定量检测,可适应于进出口水产品的快速检验。

主 题 词：沙门氏菌 副溶血性弧菌 大肠杆菌O157:H7 多重实时荧光PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-8567.2011.04.010

馆 藏 号：203145648...