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兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

作     者:肖跃强 刘吉山 杨慧 沈志强 丁壮 XIAO Yue-qiang;LIU Ji-shan;YANG Hui;SHEN Zhi-qiang;DING Zhuang

作者机构:吉林大学动物医学院长春130062 山东省滨州畜牧兽医研究院滨州256600 山东绿都生物科技有限公司滨州256600 

基  金:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题 

出 版 物:《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期:2014年第22卷第3期

页      码:82-86页

摘      要:根据GenBank公布的兔出血热病毒(Rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV)序列,设计了3条引物,对引物组合进行了筛选,优化PCR体系各反应条件,测定该方法的敏感性与特异性,并进行临床应用对比试验。结果显示,筛选出的引物组合能够特异性扩增331 bp产物,Mg2+浓度1.0~1.5 mmol/L时扩增效果最好,退火温度在50℃~60℃之间扩增无差异性。该方法可以扩增102拷贝以上的模板,对兔轮状病毒与水泡性口炎病毒检测结果均为阴性;临床应用对比实验显示,与HA检测相比,该方法检出阳性率由66.7%提升至77.8%。本研究建立的RT-PCR诊断方法具有特异、灵敏、快速等特点,能够用于该病的临床检测,为防控该病提供了技术保障。

主 题 词:兔出血热病毒 RT-PCR 建立 应用 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203145786...

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