慢病毒介导shRNA干扰结缔组织生长因子表达对百草枯致肺纤维化的影响

作     者：苏艺伟 朱伟 韦拔雄 李峰 李艳华 高原 刘移民 

作者机构：广州中山大学公共卫生学院预防医学系510080 广州市医学重点学科职业健康监护科、广州市职业环境与健康效应实验室 广州市疾病预防控制中心 广州市职业病防治院 

基　　金：广州市民生科技重大项目(2014Y2-00067) 广东省“十二五”医学重点专科、广州市医学重点专科建设项目,广州市职业健康与健康效应实验室建设项目(2014SY000020) 广州市“121人才梯队工程”后备人才项目 

出 版 物：《中华劳动卫生职业病杂志》 (Chinese Journal of Industrial Hygiene and Occupational Diseases)

年 卷 期：2015年第33卷第5期

页      码：359-362页

摘      要：目的 通过慢病毒介导发夹RNA（shRNA）干扰大鼠肺组织中结缔组织生长因子（CTGF）的表达,探索CTGF在百草枯（PQ）致肺纤维化中的作用.方法 设计CTGF-shRNA的表达质粒,并与包装质粒共转染293FT细胞构建慢病毒;将80只SD雄性大鼠随机分成对照组、PQ组、无关序列组和干扰组4组,每组20只,PQ组、无关序列组、干扰组腹腔注射PQ 18 mg/kg,对照组给予等量生理盐水,处理4h后,无关序列组和干扰组分别向气道注入50μl慢病毒液,对照组和PQ组给予50μl生理盐水,各组于处理后7、14、28、56 d分别处死5只大鼠,检测大鼠肺组织CTGF表达以及肺纤维化指标的变化情况.结果 PQ组和无关序列组大鼠在染毒后行为和肺病理改变符合PQ中毒肺损伤的变化过程,两组各实验期CTGF表达量均高于同期对照组（P＜0.05）,处理后7d开始升高,CTGF mRNA于28 d时表达量达峰值,而蛋白于56 d时表达量最高;PQ组和无关序列组肺羟脯氨酸值随着处理时间的延长而增加,与同期对照组相比,除14d外,差异均有统计学意义（P＜0.05）;而干扰组各实验期CTGF的表达量均明显低于同期PQ组和无关序列组,差异有统计学意义（P＜0.05）,其大鼠呼吸系统症状和肺病理损伤程度明显改善,肺羟脯氨酸值降低,处理后56 d肺羟脯氨酸值与PQ组和无关序列组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 慢病毒介导的shRNA干扰能够有效抑制PQ致肺纤维化模型中CTGF的表达,减轻PQ致肺纤维化的程度.

主 题 词：百草枯 肺纤维化 慢病毒 结缔组织生长因子 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2015.05.013

馆 藏 号：203145839...