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共表达伴侣蛋白对毕赤酵母产β-甘露聚糖酶发酵过程的影响

共表达伴侣蛋白对毕赤酵母产β-甘露聚糖酶发酵过程的影响

作     者:张晓龙 肖静 王瑞明 王兴吉 王正祥 Zhang Xiao-long;Xiao Jing;Wang Rui-ming;Wang Xing-ji;Wang Zheng-xiang

作者机构:齐鲁工业大学生物工程学院山东省微生物重点实验室济南250353 山东隆科特酶制剂有限公司临沂276000 天津科技大学天津300000 

基  金:山东省轻工生物基产品清洁生产与炼制协同创新中心项目(03082001) 

出 版 物:《食品工业》 (The Food Industry)

年 卷 期:2015年第36卷第11期

页      码:189-193页

摘      要:通过分别共表达伴侣蛋白PDI和Bip获得β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达。根据Gen Bank公布的毕赤酵母PDI和Bip序列设计引物,以酵母基因组为模板PCR扩增目的基因片段,插入表达载体p PICZαA,分别整合到β-甘露聚糖酶工程菌中,筛选共表达二硫键异构酶的重组酵母(PM115)和共表达免疫球重链结合蛋白的重组酵母(BM115),在30 L发酵罐水平上分析两种共表达伴侣蛋白菌株与初始菌株(GM115)对β-甘露聚糖酶表达的差异。相同工艺下,PM115与原始菌株相比未有提高,而BM115发酵产酶能力高于原始菌株,最高酶活达到40 900 U/m L,最高总蛋白表达量13.22 g/L,最高比酶活达到3 150 U/mg,分别比初始菌株提高38%,22%和18%。毕赤酵母基因工程菌GM115通过共表达伴侣蛋白Bip,提高了β-甘露聚糖酶的产量和比活力,达到工业化生产水平。

主 题 词:二硫键异构酶 免疫球重链结合蛋白 β-甘露聚糖酶 毕赤酵母 高密度发酵表达 

学科分类:081703[081703] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 0836[0836] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

馆 藏 号:203145855...

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