共表达蛋白二硫键异构酶对IFNβ-HSA融合蛋白在毕赤酵母中表达的影响

作     者：屈琳 雷楗勇 张琦 丁月娣 马晓峰 陈蕴 金坚 QU Lin, LEI Jian-yong, ZHANG Qi, et al (Department of Cellular and Molecular Pharmacology, College of Medicine and Pharmacology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China)

作者机构：江南大学医药学院细胞与分子药理研究室江苏无锡214122 

基　　金：国家高科技研究发展计划(863)资助项目(2006AA02Z153) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2010年第23卷第4期

页      码：346-349,353页

摘      要：目的探讨共表达蛋白二硫键异构酶(PDI)对干扰素β与人血清白蛋白(IFNβ-HSA)融合蛋白在毕赤酵母中表达的影响。方法根据GenBank公布的毕赤酵母PDI序列设计引物,利用PCR方法从毕赤酵母基因组中扩增目的基因片段,插入表达载体pPICZαA,并整合入融合蛋白(IFNβ-HSA)基因工程菌中,筛选共表达PDI的重组酵母菌,甲醇诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,ELISA法检测IFNβ-HSA的表达量。结果经PCR鉴定,重组表达质粒pPICZαA-PDI已转入毕赤酵母KM71/pPIC9K-IFNβ-HSA中。经SDS-PAGE分析,PDI在菌体内大量表达,原始菌株和共表达菌株均明显表达融合蛋白IFNβ-HSA,共表达PDI菌株表达量提高了60%,ELISA法测定达(22.49±3.52)mg/L。结论共表达PDI能促进外源蛋白的分泌表达,为进一步研究在毕赤酵母中过量表达分子伴侣对其分泌外源蛋白的影响奠定了基础。

主 题 词：蛋白二硫键异构酶 毕赤酵母 分子伴侣 干扰素β 人血清白蛋白 融合蛋白 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13200/j.cjb.2010.04.16.qul.002

馆 藏 号：203146437...