HER-2/neu基因沉默对子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞增殖及其对孕激素敏感性的影响

作     者：刘淼 魏敏杰 赵福杰 

作者机构：中国医科大学附属盛京医院辽宁沈阳110004 中国医科大学药理教研室辽宁沈阳110001 

出 版 物：《沈阳药科大学学报》 (Journal of Shenyang Pharmaceutical University)

年 卷 期：2008年第25卷第S1期

页      码：64-64页

摘      要：目的研究shRNA表达质粒稳定转染,靶向沉默HER-2/neu基因对子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞增殖及其对孕激素敏感性的影响。方法根据HER-2/neumRNA的序列设计和合成两条shRNA.分别将其与质粒(pSilencer4.1CMV neo,Ambion)连接,并将连接好的质粒通过LipofectamineTM2000(invitrogen)转染Ishikawa细胞株。应用含有250μg·mL-1G418的DMEM培养基筛选稳定转染克隆。用RT-PCR法及Western blot分别检测稳定转染细胞HER-2/neumRNA及p185蛋白表达水平,用Annexin-V检测细胞凋亡率。用10μg.μL-1孕激素培养细胞72小时后,用MTT法分别检测转染细胞及未转染细胞的增殖率。结果转染特异性shRNA表达质粒组Ishikawa细胞HER-2/neumRNA及p185蛋白表达水平明显低于对照组细胞。细胞增殖率明显降低而细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。用10μg.μL-1孕酮培养细胞72小时后,转染特异性shRNA的细胞组细胞增殖率明显低于未转染细胞组(P<0.05)。结论RNA干扰可以明显降低Ishikawa细胞株HER-2/neumRNA及185蛋白的表达,从而抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。HER-2shRNA还可以增加Ishikawa细胞株对孕激素的敏感性,与孕激素存在协同效应。

主 题 词：HER-2/neu 子宫内膜癌 RNA干扰 shRNA 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2008.s1.070

馆 藏 号：203146450...