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羊痘病毒实时荧光定量TaqMan PCR检测方法的建立

羊痘病毒实时荧光定量TaqMan PCR检测方法的建立

作     者:康文玉 徐自忠 花群义 杨云庆 周晓黎 董俊 尹尚莲 高洪 KANG Wen-yu;XU Zi-zhong;HUA Qun-yi;YANG Yun-qing;ZHOU Xiao-li;DONG Jun;YIN Shang-lian;GAO Hong

作者机构:云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201 云南出入境检验检疫局技术中心云南昆明650228 

基  金:国家质检总局重点科技项目(2004IK1113-1) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2006年第36卷第7期

页      码:529-533页

摘      要:参照羊痘病毒(CaPV)P32的基因序列,设计合成了2套引物和1条探针,建立了实时荧光定量PCR技术,对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验。结果显示,用300 nmol/L引物浓度和200 nmol/L探针浓度,获得的Cr值较小,而△Rn最大;可检测到相当于0.1 TCID50的病毒DNA;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0.999 5以上;组内和组间试验重复性的变异系数分别为2.3%和3.4%;与常规的PCR相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,可同时检测大量样品等优点。表明。荧光TaqMan PCR是一种检测CaPV的良好方法,可对组织病料中低含量的CaPV或持续带毒宿主进行准确检测。

主 题 词:羊痘病毒 荧光定量TaqMan PCR 检测 

学科分类:090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1673-4696.2006.07.004

馆 藏 号:203146526...

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