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趋化因子受体CXCR4 shRNA真核表达载体的构建

趋化因子受体CXCR4 shRNA真核表达载体的构建

作     者:温德升 朱秀丽 张红菊 郭青玉 王静 吴军正 Wen Desheng, Zhu Xiuli, Zhang Hongju,et al. Department of Oral Biology, School of Stomatology, The Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, China

作者机构:西安第四军医大学口腔医院口腔生物教研室710032 武警总医院口腔科 第四军医大学西京医院妇产科 

基  金:国家自然科学基金资助项目(编号:30371551) 

出 版 物:《实用口腔医学杂志》 (Journal of Practical Stomatology)

年 卷 期:2007年第23卷第2期

页      码:213-216页

摘      要:目的:构建趋化因子受体(CXCR4)特异的RNA干扰质粒载体。方法:根据GenBank数据库提供的CXCR4基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-CXCR4)稳定转染至人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系,并应用RT-PCR和流式细胞术对细胞CXCR4的表达进行检测。结果:与Mc3细胞和转染空白质粒pWH1 Mc3细胞相比,转染pWH1-CXCR4表达载体的Mc3细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论:构建的CXCR4特异性shRNA表达载体可有效的沉默CXCR4基因,为进一步研究CX-CR4表达对涎腺黏液表皮样癌增殖和转移的意义及治疗涎腺黏液表皮样癌奠定了基础。

主 题 词:涎腺 黏液表皮样癌 短发夹状RNA 真核表达载体 趋化因子受体4 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-3733.2007.02.015

馆 藏 号:203147014...

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