睫状神经营养因子突变体的克隆、表达、纯化及生物学活性

作     者：毕华 袁力勇 史新昌 李永红 赵阳 饶春明 王军志 

作者机构：中国药品生物制品检定所生化室北京100050 

基　　金：国家高技术研究发展计划(2003AA2Z3480) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2007年第20卷第5期

页      码：313-317页

摘      要：目的设计具有更高生物学活性的睫状神经营养因子突变体,并对其进行表达、纯化及生物学活性检测。方法以计算机分子模拟系统设计突变体,重叠延伸PCR方法获得突变体的编码区DNA序列,克隆入表达载体pThioHisA,转化***21,以IPTG诱导表达。复性纯化后,用鸡胚背根神经节无血清培养法和小鼠减重法进行生物学活性测定。结果目的蛋白以包涵体形式存在,表达量在35%以上,纯化后的纯度达95%以上,能有效地促进鸡胚背根神经节的生长,并能使正常小鼠的体重降低,脂肪指数下降。结论所设计的突变体经表达及纯化后,具有良好的生物学活性,为进一步研究突变体蛋白的促神经生长和减肥作用奠定了基础。

主 题 词：睫状神经营养因子 突变体 克隆 表达 生物学活性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13200/j.cjb.2007.05.6.bih.001

馆 藏 号：203147014...