急性单核白血病细胞系THP-1细胞MLL-AF9融合基因沉默对p27表达的影响

作     者：李蕾 刘凌波 王利 邹萍 LI Lei;LIU Ling-bo;WANG Li;ZOU Ping

作者机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所湖北武汉430022 

出 版 物：《中华血液学杂志》 (Chinese Journal of Hematology)

年 卷 期：2008年第29卷第6期

页      码：375-378页

摘      要：目的研究急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞MLL-AF9融合基因沉默对p27表达及转录调控的影响。方法选择THP-1细胞特有的MLL-AF9融合基因为靶基因，设计并合成MLL-AF9小干扰RNA（siRNA）片段。应用脂质体转染方法，将MLL-AF9 siRNA导入细胞，通过流式细胞术检测siRNA转染效率，用RT-PCR法比较转染前后MLL-AF9 mRNA表达水平的变化，Western blot检测MLL-AF9蛋白水平沉默效果，比较细胞周期抑制蛋白p27表达变化，利用染色质免疫沉淀（Chromatin Immunoprecipitation，CHIP）技术研究MLL-AF9融合蛋白是否与p27启动子结合。结果转染MLL-AF9 siRNA后THP-1细胞MLL-AF9 mRNA相对表达水平（0．31±0．07）较对照组（1．25±0．13）明显受抑（P〈0．叭），p27mRNA表达水平（0．84±0．12）较对照组（0．35±0．03）明显上调（P〈0．01），应用ChIP结合PCR扩增的方法分析发现MLL-AF9融合蛋白可与THP-1细胞p27基因启动子区域的DNA片段结合。结论MLL-AF9融合基因沉默后可使p27表达上调，其机制可能为MLL-AF9基因沉默解除了MLL-AF9融合蛋白与p27启动子的结合，从而恢复p27基因的表达。

主 题 词：融合基因类 MLL-AF9 基因 p27 基因表达 细胞系 THP-1 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0253-2727.2008.06.004

馆 藏 号：203147048...