爱玉ISSR反应体系的建立与优化

作     者：史辉 黄其梅 叶美娜 阮少江 陈勇 SHI Hui;HUANG Qimei;YE Meina;RUAN Shaojiang;CHEN Yong

作者机构：宁德师范学院生物系福建宁德352100 闽东特色生物资源福建省高校工程研究中心福建宁德352100 

基　　金：宁德师范学院"服务海西建设"资助项目(2010H309) 福建省自然科学基金资助项目(2006JA0399) 福建省大学生创新创业训练计划资助项目(201310398019) 

出 版 物：《吉首大学学报（自然科学版）》 (Journal of Jishou University(Natural Sciences Edition))

年 卷 期：2014年第35卷第2期

页      码：73-78页

摘      要：通过单因子试验和正交设计,对影响爱玉ISSR-PCR扩增效果的因素,如模板DNA用量、Taq酶用量、dNTPs浓度、引物浓度、延伸时间和循环次数等指标进行优化.实验确立了可用于爱玉ISSR-PCR分析最适宜的反应体系:20μL反应体积中含1ng模板DNA、1.0U Taq酶、0.4μmol/L引物和0.18mmol/L dNTPs;PCR扩增程序为94℃预变性4min;94℃变性45s,53℃退火45s,72℃延伸2.5min,共35个循环;72℃延伸7min,4℃保存.应用该体系对14份爱玉种质进行扩增,证实了该体系的适用性和稳定性.

主 题 词：爱玉 ISSR 反应体系 正交设计 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-2985.2014.02.017

馆 藏 号：203147319...