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通过N端引入芳香族氨基酸提高木聚糖酶的热稳定性

通过N端引入芳香族氨基酸提高木聚糖酶的热稳定性

作     者:柏文琴 杨鲁红 马延和 Wenqin Bai;Luhong Yang;Yanhe Ma

作者机构:山西师范大学生命科学学院山西临汾041004 中国科学院天津工业生物技术研究所工业酶国家工程实验室天津300308 中国科学院微生物研究所工业酶国家工程实验室北京100101 

基  金:中国科学院重点部署项目(No.KSZD-EW-Z-015) 国家自然科学基金(No.31301245)资助~~ 

出 版 物:《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期:2014年第30卷第8期

页      码:1217-1224页

摘      要:耐热的木聚糖酶具有用于造纸、麻类脱胶和饲料生产等工业领域的巨大潜力,为了提高11家族碱性木聚糖酶Xyn11A-LC的热稳定性,通过理性设计在N-末端引入了芳香族氨基酸(T9Y和D14F)。测定野生型和突变体的性质表明,突变体的最适反应温度和热稳定性均获得了提高。突变体的最适反应温度比野生型提高了5℃。野生型在65℃的Tris/HCl缓冲液(pH 8.0)中的半衰期为22 min,而突变体在此条件下的半衰期为106 min。圆二色光谱测定结果显示野生型和突变体的Tm分别为55.3℃和67.9℃。因此,通过在N-末端引入芳香族氨基酸可以提高11家族木聚糖酶的热稳定性和在高温下的活性。

主 题 词:木聚糖酶 热稳定性 芳香族氨基酸 疏水作用 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 071010[071010] 081704[081704] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 0836[0836] 

核心收录:

D O I:10.13345/j.cjb.140194

馆 藏 号:203147344...

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