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不同条件下两株溶磷菌溶磷量及葡萄糖脱氢酶基因表达与酶活分析

不同条件下两株溶磷菌溶磷量及葡萄糖脱氢酶基因表达与酶活分析

作     者:杨美英 王春红 武志海 于亭 孙合美 刘晶晶 Meiying Yang;Chunhong Wang;Zhihai Wu;Ting Yu;Hemei Sun;Jingjing Liu

作者机构:吉林农业大学生命科学院/农学院吉林长春130118 

基  金:国家自然科学基金(31201687) 

出 版 物:《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期:2016年第56卷第4期

页      码:651-663页

摘      要:【目的】获得大豆根际土壤中溶磷能力较强的菌株,明确在菌株溶磷过程中葡萄糖脱氢酶(GDH)的作用特点及其基因的表达水平。【方法】利用溶磷圈方法分离与纯化溶磷菌株,采用Vitek 2系统和16S r RNA序列分析菌株的分类地位;测定2菌株的溶磷量、GDH活性,并根据GDH基因的保守区序列设计引物,克隆GDH基因,利用实时荧光定量PCR测定不同条件下基因的相对表达量。【结果】筛选出2株具有较强溶磷能力的溶磷菌,分别鉴定为Pseudomonas sp.和Enterobacter sp.,2菌株最高溶磷量分别为558μg/m L和478μg/m L;成功地克隆了2株溶磷菌的GDH基因,片段大小分别为2007 bp和2066 bp;2菌株在不同磷源、不同p H值培养基中GDH活性及基因表达量不同,菌株wj1在高磷条件下基因表达量最高,磷胁迫条件下基因表达量较低,而wj3在不同磷源条件下GDH基因表达量都较低。且GDH基因表达量及酶活的变化与wj3菌株溶磷量没有直接的关系。【结论】从大豆根际土壤中分离获得溶磷能力较强的菌株Pseudomonas ***1和Enterobacter ***3,GDH活性及基因表达在2株菌溶磷过程中具有不同的作用特点,2菌株溶磷机制不完全相同。

主 题 词:溶磷菌 溶磷量 葡萄糖脱氢酶 Pseudomonas sp. Enterobacter sp. 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 071005[071005] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13343/j.cnki.wsxb.20150297

馆 藏 号:203147404...

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