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RNA干扰DJ-1基因抑制喉癌细胞的增殖

RNA干扰DJ-1基因抑制喉癌细胞的增殖

作     者:祝小林 文卫平 蒋爱云 雷文斌 苏振忠 ZHU Xiao-lin;WEN Wei-ping;JIANG Ai-yun;LEI Wen-bin;SU Zhen-zhong

作者机构:中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院中山大学耳鼻咽喉科学研究所广州510800 

基  金:2005年度华南肿瘤学国家重点实验室开放课题(2006-2) 

出 版 物:《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 (Chinese Journal of Otorhinolaryngology Head and Neck Surgery)

年 卷 期:2008年第43卷第5期

页      码:374-378页

摘      要:目的探讨RNA干扰(RNAi)抑制喉癌Hep-2细胞DJ-1基因的表达及观察其细胞效应。方法设计合成3对特异性针对人DJ-1基因的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染Hep-2细胞,实验分为4组:瞬时转染非特异性siRNA对照组及转染特异性siRNA 3组(siRNAl、siRNA2、siRNA3)。采用RT-PCR检测DJ-1 mRNA,蛋白免疫印迹法检测DJ-1蛋白,流式细胞仪检测细胞凋亡及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测特异性siRNA1组对Hep-2细胞效应。结果本实验设计合成的3对特异性siRNA均不同程度地抑制DJ-1基因表达,其中特异性siRNA1组抑制效果最佳。MTT比色法结果显示特异性siRNA1组(终浓度50nmoL/L、100nmoL/L)对Hep-2细胞增殖具有抑制作用。流式细胞仪检测结果显示特异性siRNA1组能诱导Hep-2细胞凋亡,转染特异性siRNA1组凋亡率为(15.7±4.8)%,非特异性siRNA对照组凋亡率为(4.5±0.4)%,非特异性siRNA对照组与特异性siRNA1组凋亡率比较差异有统计学意义(t=4.736,P〈0.01)。结论转染特异性siRNA组能有效抑制Hep-2细胞增殖,诱导Hep-2细胞凋亡。

主 题 词:喉肿瘤 基因疗法 RNA干扰 RNA,小分子干扰 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1673-0860.2008.05.013

馆 藏 号:203147874...

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