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融合蛋白hJagged1^(ext)-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达

融合蛋白hJagged1^(ext)-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达

作     者:李国辉 康志杰 黄斯勇 何飞 徐恒 张丽 伍艳兰 牛晓丽 马长升 韩骅 梁英民 LI Guo-Hui;KANG Zhi-Jie;HUANG Si-Yong;HE Fei;XU Heng;ZHANG Li;WU Yan-Lan;NIU Xiao-Li;MA Chang-Sheng;HAN Hua;HANG Ying-Min

作者机构:第四军医大学唐都医院血液科陕西西安710038 第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室陕西西安710032 第四军医大学生物医学工程系陕西西安710032 

基  金:"十一五"国家"863"重大项目 "十一五"国家"863"重点项目基金资助 编号2006AA02A111 

出 版 物:《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期:2008年第16卷第4期

页      码:910-914页

摘      要:本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达。用RT-PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段。在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC-Fc载体,得到PIC-hJagged1ext-Fc。用MD平板筛选重组子,G418法筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,采用SDS-PAGE分析表达蛋白。结果表明:hJagged1基因的胞外段被有效地扩增。序列分析显示所构建的含phJagged1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc得到正确表达。结论:成功地构建了hJagged1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础。

主 题 词:Jagged1 hJagged1^ext-Fc 造血干/祖细胞 Notch 融合蛋白 毕赤酵母 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号:203147955...

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