应用RNA干扰抑制乙肝病毒X基因促HepG2细胞凋亡的作用

作     者：范宝峰 刘晓梅 甘宜敏 史震 汤仁仙 郑葵阳 FAN Bao-Feng;LIU Xiao-Mei;GAN Yi-Min;SHI Zhen;TANG Ren-Xian;ZHENG Kui-Yang

作者机构：徐州医学院病原生物与免疫教研室徐州221002 

基　　金：江苏省高校自然科学基金(07KJD310220)项目 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2009年第25卷第8期

页      码：699-703页

摘      要：目的:构建靶向乙肝病毒X基因(HBX)的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并应用其体外抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用。方法:设计并构建靶向HBX的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,脂质体转染法将HBX表达载体pcDNA3.1-HBX与pSilencer3.1-shHBX共转染人肝癌HepG2细胞,培养72小时后,分别以RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测HBX的表达量。Annexin V-FITC/PI双染经流式细胞仪检测细胞的凋亡变化。结果:重组质粒pSilencer3.1-shHBX酶切鉴定和测序结果均与设计的一致。该质粒使HBX基因mRNA表达量降低了47.1%,进而使HBx蛋白表达量降低了58.9%,HBx蛋白荧光强度减弱,并使HBX诱导的HepG2细胞凋亡率降低了52.11%。而阴性对照质粒无此作用。结论:成功构建靶向HBXshRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并可应用其抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用。

主 题 词：HBX RNA干扰 凋亡 HepG2 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203148467...