独一味基因表达SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：杨晓丽 罗桂花 陈志 乔枫 YANG Xiao-li;LUO Gui-hua;CHEN Zhi;QIAO Feng

作者机构：青海师范大学生命与地理科学学院/青藏高原资源与环境教育部重点实验室青海西宁810008 

基　　金：教育部春晖计划项目(Z2010076) 

出 版 物：《广东农业科学》 (Guangdong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2014年第41卷第12期

页      码：133-137,I0002页

摘      要：为了建立一种检测独一味mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量Real-Time PCR方法.根据独一味查尔酮合成酶（LrCHS）和苯丙氨酸解氨酶（LrPAL）基因序列设计特异性引物,运用Real-Time RT-PCR方法建立独一味基因的荧光定量标准曲线,进一步研究独一味CHS和PAL基因在不同组织中的表达.结果显示,扩增曲线在1×10^5～1×10^11 copies/μL范围内有很好的线性关系,扩增相关系数在0.995以上.熔解曲线分析表明,产物为特异单峰,无引物二聚体,具有较高的特异性和灵敏度.独一味CHS基因在不同组织中表达量顺序为花＞叶＞叶柄＞根＞茎,PAL基因表达量顺序为叶柄＞叶＞花＞根＞茎.建立的检测方法能够成功用于独一味CHS和PAL基因表达的检测,为研究独一味在mRNA水平的定量分析提供技术平台.

主 题 词：独一味 SYBR Green Ⅰ 荧光定量RT-PCR CHS PAL 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-874X.2014.12.030

馆 藏 号：203148853...