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猪源Lin28基因的克隆及其在猪胎儿成纤维细胞中的表达

猪源Lin28基因的克隆及其在猪胎儿成纤维细胞中的表达

作     者:刘忠华 韩小娇 张鑫淼 王娟 牟彦双 何文腾 黄天晴 孔庆然 姜丹丹 丛义梅 尹智 

作者机构:东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 

基  金:国家"973"计划重大科学研究项目(2009CB941002 2009CB932004) 黑龙江省杰出青年基金(JC200905) 

出 版 物:《东北农业大学学报》 (Journal of Northeast Agricultural University)

年 卷 期:2012年第43卷第9期

页      码:26-31,I0001页

摘      要:Lin28广泛地表达于早期胚胎中,是重编程的一个重要诱导因子。根据GenBank中公布的猪源Lin28的序列设计合成引物,以猪桑葚胚cDNA为模板,通过RT-PCR方法扩增其编码区全序列。将此克隆片段连接到PMXs表达载体上,构建逆转录病毒载体PMXs-Lin28。在293T细胞中包装携带Lin28基因的逆转录病毒,感染猪如猪胎儿成纤维细胞(Porcine embryonic fibroblasts,PEF)。免疫荧光及Real-time结果显示,PMXs-Lin28载体能够介导Lin28 mRNA和蛋白质在猪胎儿成纤维细胞中的高效表达,Lin28基因能够激活Oct4、Sox2、Nanog、Klf4和c-Myc基因的表达。

主 题 词: Lin28 成纤维细胞 过表达 

学科分类:080801[080801] 0808[工学-自动化类] 08[工学] 

D O I:10.3969/j.issn.1005-9369.2012.09.008

馆 藏 号:203149914...

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