东北白鹅CD4基因的克隆及其胞外区的表达与抗血清的制备

作     者：张雪莲 魏双施 邵建伟 母晓宇 高明春 张文龙 马波 王君伟 

作者机构：东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 

基　　金：黑龙江省"十二五"科技攻关项目(GA09B302) 高校博士学科点专项基金(20102325110004) 黑龙江省青年基金(QC04C32) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2014年第45卷第4期

页      码：639-646页

摘      要：本研究根据GenBank公布的绿头鸭CD4(AF378701)基因序列设计引物,RT-PCR获得东北白鹅CD4基因。根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD4胞外区基因,并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白获得表达,Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白,以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗鹅CD4胞外区抗血清。I-ELISA、Western blot和流式细胞仪分析表明抗血清可特异识别重组蛋白以及分离获得的东北白鹅外周血T淋巴细胞,间接免疫荧光试验证实纯化的抗血清可特异性识别瞬时真核表达的鹅CD4胞外区蛋白。以上结果说明制备的抗血清可作为鹅CD4+T淋巴细胞的检测试剂。

主 题 词：东北白鹅 CD4 基因表达 T淋巴细胞 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2014.04.019

馆 藏 号：203149967...