人白细胞介素-3基因翻译起始区的改造提高其在大肠杆菌中的表达水平

作     者：杨立宏 陈常庆 高冕 苏成芝 

作者机构：第四军医大学生物化学教研室西安710032 中国科学院上海生物工程研究中心上海200233 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：1995年第11卷第4期

页      码：297-303页

摘      要：为了提高人白细胞介素-3(hIL-3)在大肠杆菌中的表达,在计算机辅助下,设计合成了PCR突变引物,用于改造起始密码AUG上下游序列,并在不改变5＇端氨基酸编码的前提下,尽可能选用大肠杆菌高频使用的密码子。将经改造后的hIL-3cDNA和翻译起始区置于P_L启动子之下,转入大肠杆菌Tap106,经42℃热诱导后,获得表达产物,提高表达水平近一倍,表达量达到菌体总蛋白量的30％左右。表达产物经Western blot验证,经PVDF膜转移后进行N端顺序分析,证明前15个氨基酸正确,产物经包涵体纯化后,纯度提高至80％以上,初步复性后能明显促进hIL-3依赖细胞的生长。

主 题 词：人白细胞介素-3 基因 大肠杆菌 表达 基因工程 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 1001[医学-基础医学] 08[工学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13345/j.cjb.1995.04.001

馆 藏 号：203150035...