siRNA沉默CXCR4基因的实验研究

作     者：张霖 史玉荣 魏熙胤 杨毅 牛瑞芳 姚智 ZHANG Lin;SHI Yu-rong;WEI Xi-yin;YANG Yi;NIU Rui-fang;YAO Zhi

作者机构：天津医科大学肿瘤医院中心实验室天津300060 天津医科大学免疫学教研室 

基　　金：天津医科大学科研基金资助项目(2005KY41) 

出 版 物：《天津医科大学学报》 (Journal of Tianjin Medical University)

年 卷 期：2007年第13卷第3期

页      码：336-339页

摘      要：目的:设计和构建趋化因子受体4(CXCR4)基因的小干扰RNA质粒,并初步验证其对靶基因的抑制作用。方法:选择高表达CXCR4受体的人乳腺癌细胞系T47D作为研究对象。将预先设计的3段siRNA分别连入质粒载体,然后转化大肠杆菌,经过克隆、扩增、纯化后转染到T47D细胞中,G418筛选稳定表达细胞株,采用流式细胞术从蛋白水平检测CXCR4的表达率,实时定量PCR从基因转录水平检测CXCR4基因的表达率。结果:流式细胞术检测结果显示,T47D细胞经特异性siRNA作用后CXCR4的表达率由69.00%分别下降到4.95%、11.30%、5.53%。实时相对定量PCR检测结果显示,siRNA作用的细胞其CXCR4基因转录的抑制率分别为95.67%、85.94%、98.25%。结论:siRNA能够引发人乳腺癌细胞系T47D的CXCR4基因沉默,为进一步探讨CXCR4基因在乳腺癌转移中的作用奠定前期实验基础,也为siRNA作为一种可能的治疗手段提供了理论依据。

主 题 词：乳腺癌 CXCR4 小干扰RNA 基因表达 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 08[工学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-8147.2007.03.008

馆 藏 号：203150097...