犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：杨井泉 韩猛立 朱艳平 黄新 薄新文 YANG Jing-quan;HAN Meng-li;ZHU Yan-Ping;HUANG Xin;BO Xin-wen

作者机构：石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆农垦科学院/新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室新疆石河子832000 新乡学院生命科学与技术系河南新乡453003 

基　　金：国家产业技术体系专项(NYCYTX-40-13) 家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题(SKLVEB2009KFKT016) 

出 版 物：《新疆农业科学》 (Xinjiang Agricultural Sciences)

年 卷 期：2011年第48卷第6期

页      码：1098-1103页

摘      要：【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、DNA病毒犬细小病毒(CPV)以及正常Vero细胞中均未扩增出该条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-3稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。重复性实验表明,不同情况下的3次重复实验,结果相同。用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV的病料进行检测,结果表明,该研究建立的RT-nested PCR不仅能有效的检测CDV感染,而且能够检测不同组织的样品。【结论】建立的RT-nested PCR检测方法,适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查。

主 题 词：犬瘟热病毒 反转录巢式PCR lit—PCR NP基因 

学科分类：090601[090601] 090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203150251...