稳定沉默Rictor表达的前列腺癌CWR22RV1的构建

作     者：陈先国 梁朝朝 CHEN Xian-guo;LIANG Chao-zhao

作者机构：安徽医科大学第一附属医院泌尿外科合肥230022 

基　　金：教育部博士点基金(20113420110003) 安徽省自然科学基金(1208085MH138) 

出 版 物：《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 (Journal of Contemporary Urologic and Reproductive Oncology)

年 卷 期：2012年第4卷第4期

页      码：219-222页

摘      要：目的应用RNA沉默技术下调前列腺癌CWR22RV1细胞株的Rictor基因表达,并筛选具有稳定转染Rictor-shRNA的细胞株,为进一步研究Rictor在前列腺癌中的作用打下基础。方法针对Rictor基因设计合成siRNA序列;鉴定、测序并转染293T细胞观察基因表达情况;构建Rictor-shRNA慢病毒载体;进行Rictor-shRNA慢病毒包装及滴度测定;筛选稳定表达Rictor-shRNA的前列腺癌CWR22RV1细胞株;Western blot检测稳定转染前列腺癌CWR22RV1细胞株Rictor的表达水平。结果 Rictor-shRNA慢病毒成功包装后转染前列腺癌CWR22RV1细胞,进行嘌呤霉素筛选,获得沉默Rictor基因的前列腺癌CWR22RV1细胞株,Western blot检测显示该细胞株Rictor水平明显降低(P<0.01)。结论成功构建了稳定沉默Rictor表达的前列腺癌CWR22RV1细胞株,为后续的实验了打下坚实的基础。

主 题 词：前列腺肿瘤 Rictor 慢病毒属 CWR22RV1 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3870/j.issn.1674-4624.2012.04.010

馆 藏 号：203150318...