RNAi沉默SOX2表达增强Hep-2化疗药物敏感性作用研究

作     者：杨宁 惠莲 杨会军 姜学钧 YANG Ning;HUI Lian;YANG Huijun;JIANG Xuejun

作者机构：中国医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科沈阳110001 

基　　金：辽宁省自然科学基金项目(No:201202287) 

出 版 物：《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 (Journal of Clinical Otorhinolaryngology Head And Neck Surgery)

年 卷 期：2014年第28卷第16期

页      码：1238-1244页

摘      要：目的:研究SOX2表达对人喉癌上皮细胞Hep-2化疗敏感性的影响。方法:设计合成RNAi-SOX2序列,瞬时转染Hep-2细胞,Western blot法筛选沉默效率最好的RNAi-SOX2构建pGCsi-H1-SOX2质粒,并构建其对照质粒pGCsi-H1-NC,分别转染Hep-2细胞建立稳定沉默SOX2表达细胞株psiSOX2-Hep-2及其对照细胞株psiNC-Hep-2。CCK-8法检测SOX2表达沉默对Hep-2细胞对化疗药物敏感性的影响;Hoechst染色法检测SOX2表达沉默对化疗药物诱导Hep-2细胞凋亡的影响;Western blot法检测SOX2表达沉默对凋亡相关基因Survivin、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3表达的影响。结果:成功获取SOX2表达沉默细胞株psiSOX2-Hep-2及其对照psiNC-Hep-2细胞株,与psiNC-Hep-2细胞相比,psiSOX2-Hep-2中SOX2表达下降78%。SOX2表达沉默后,psiSOX2-Hep-2细胞对5-FU和紫杉醇的敏感性均增强,psiSOX2-Hep-2细胞48h的IC50值分别下降到8.12μg/ml和5.16μg/ml;同时,psiSOX2-Hep-2细胞凋亡数增多;抗凋亡基因Survivin、Bcl-2表达下降明显,凋亡基因Bax、cleaved caspase-3表达显著上升。结论:RNAi沉默SOX2表达将显著增强人喉癌上皮细胞Hep-2对5-FU和紫杉醇的敏感性。

主 题 词：喉肿瘤 SOX2 Hep-2 紫杉醇 药物敏感性 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.13201/j.issn.1001-1781.2014.16.016

馆 藏 号：203150416...