新型鸭呼肠孤病毒σC基因原核表达及其抗原性的初步研究

作     者：王锦祥 程晓霞 陈少莺 陈仕龙 林锋强 王劭 李兆龙 WANG Jin-xiang;CHENG Xiao-xia;CHEN Shao-ying;CHEN Shi-long;LIN Feng-qiang;WANG Shao;Li Zhao-long

作者机构：福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA10A209) 福建省科技计划项目--省属公益类科研院所基本科研专项(2013R1025-1) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2014年第29卷第4期

页      码：310-313页

摘      要：应用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒σC基因,分析σC蛋白的抗原性。根据已登录的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)NP03株S1基因序列,针对σC基因设计并合成1对特异性引物,用RT-PCR扩增该基因,并将此片段克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,将序列正确的重组质粒命名为pET-NDRV-σC,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1.0mmol·L-1 IPTG 37℃诱导表达。结果显示,RT-PCR扩增得到966bp的目的片段;表达产物经SDS-PAGE分析,获得了与预期相符的约41.3ku的条带,重组蛋白主要以包涵体形式存在;Western blotting分析显示,重组蛋白能与NDRV阳性血清发生反应。本试验首次应用原核表达系统获得NDRVσC蛋白,并证明其具有免疫反应性。

主 题 词：新型鸭呼肠孤病毒 σC蛋白 原核表达 Western blotting 抗原性 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0384.2014.04.003

馆 藏 号：203150599...