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牛新孢子虫基因芯片检测方法的建立

牛新孢子虫基因芯片检测方法的建立

作     者:史茜 唐慧芬 牛国辉 季新成 于学辉 王科珂 SHI Qian;TANG Hui-fen;NIU Guo-hui;JI Xin-cheng;YU Xue-hui;WANG Ke-ke

作者机构:新疆出入境检验检疫局新疆乌鲁木齐830063 新疆天康生物技术有限公司新疆乌鲁木齐830011 新疆计量测试研究院新疆乌鲁木齐830000 

基  金:国家质量监督检验检疫总局科研项目(2011IK011 2011IK017) 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2014年第36卷第9期

页      码:715-719页

摘      要:为建立牛新孢子虫准确快速检测方法,本研究根据犬新孢子虫NcSAG1基因、Nc5基因和NcSRS2基因,以及弓形虫GRA6基因和牛性腺基因,设计合成相应的5对引物和5条芯片探针,以牛性腺基因为内标监控基因,进行芯片杂交试验,经反应条件的优化,建立了含监控内标,可对新孢子虫3个基因进行同步检测,并可与弓形虫GRA6基因进行区分检测的基因芯片检测方法.该方法对新孢子虫的最低检测限分别为102拷贝/μL,并且具有良好的特异性和重复性.利用建立的方法对157例临床样品进行检测,与普通PCR检测结果符合率为99.3 %~98%.该方法的建立为新孢子虫等多病原高通量检测方法的研究奠定基础.

主 题 词:牛新孢子虫 多基因 内标 基因芯片 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1008-0589.2014.09.13

馆 藏 号:203150910...

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