鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及应用

作     者：赵杰 徐建义 隋兆峰 迟灵芝 杨明彩 沈美艳 韩春杨 ZHAO Jie;XU Jian-yi;SUI Zhao-feng;CHI Ling-zhi;YANG Ming-cai;SHEN Mei-yan;HAN Chun-yang

作者机构：安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261061 

基　　金：公益性行业(农业)科研专项(201303044) 国家自然科学基金资助项目(31172358) 国家星火计划项目(2013GA740076) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2015年第45卷第7期

页      码：706-710页

摘      要：为了建立鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)套式PCR检测方法并初步将其应用于临床检测,对目前常用的5对引物(gapA-F/gapA-R、16SrRNA-F/16SrRNA-R、mgc2-F1/mgc2-R1、mgc2-F2/mgc2-R2、LP-F/LP-R)检测MG的灵敏度进行了比较,从中选出灵敏度较强的引物建立套式PCR检测方法,同时进行了特异性、敏感性及临床检测试验。结果表明,以mgc2基因设计的引物灵敏度最高,能检测出的MG的最低质量浓度为57.6pg/μL,用此引物建立的套式PCR能够扩增的基因片段的大小为300bp,与GenBank中收录的相关序列的同源性为98%,而与大肠杆菌、沙门菌、鸡滑液囊支原体均无交叉反应,能够检测出DNA的最小质量浓度为0.18fg/μL。通过对山东地区疑似MG的50只病死鸡进行检测,阳性检出率为80%。本研究建立的鸡毒支原体套式PCR具有敏感性高、特异性强等优点,可用于MG的临床诊断和分子流行病学调查。

主 题 词：鸡毒支原体 套式PCR mgc2 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2015.07.006

馆 藏 号：203151991...