特异性的shRNA抑制c－Jun蛋白表达对HepG2细胞增殖和迁移的影响

作     者：罗文雅 周凯 胡磊 李向阳 孔凡运 尤红娟 汤仁仙 LUO Wenya;ZHOU Kai;HU Lei;LI Xiangyang;KONG Fanyun;YOU Hongjuan;TANG Renxian

作者机构：徐州医学院病原生物学与免疫学教研室感染与免疫实验室江苏徐州221004 

基　　金：江苏省脑病生物信息重点实验室开放研究课题(Jsb11401):江苏高校优势学科建设工程(2014) 徐州医学院科研课题(2012KJ05) 徐州市科技局研究课题(XZZD1330) 

出 版 物：《徐州医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Xuzhou)

年 卷 期：2015年第35卷第10期

页      码：648-653页

摘      要：目的：构建c－Jun特异性的shRNA及研究其抑制c－Jun蛋白表达对人类肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响。方法根据c－Jun编码序列设计并构建shRNA质粒，利用LipofectamineTM 2000转染HepG2细胞，荧光显微镜观察转染效率。 Western blot检测其对c－Jun蛋白表达的影响。 CCK－8增殖实验、平板克隆形成实验观察HepG2细胞的增殖情况，transwell和划痕愈合实验方法观察细胞的迁移情况。结果构建了c－Jun小干扰质粒shRNA－1和shRNA－2。荧光显微镜观察到shRNA质粒在HepG2细胞转染效率约在80％。 Western blot显示shRNA－2小干扰质粒对c－Jun抑制效果要强于shRNA－1小干扰质粒。功能实验结果显示，与阴性对照组相比，shRNA－2能显著抑制HepG2细胞的增殖、克隆形成及其迁移能力（P均＜0．05）。结论成功构建了对c－Jun有效shRNA干扰质粒，下调c－Jun的表达能够明显抑制肝癌细胞的增殖和迁移，为进一步研究c－Jun在肝癌中的作用及相关机制提供了工作基础。

主 题 词：RNA小干扰 HepG2细胞 增殖 迁移 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号：203152006...