羟基磷灰石分离纯化抗TNF-α单克隆抗体

作     者：杨辉 马旭通 孙文正 杨彬 王雅秋 林小鹊 YANG Hui;MA Xu-tong;SUN Wen-zheng;YANG Bin;WANG Ya-qiu;LIN Xiao-que

作者机构：广东东阳光药业有限公司广东东莞523000 

基　　金：广东省引进创新科研团队计划资助(201101Y0104990178) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2015年第28卷第12期

页      码：1327-1331页

摘      要：目的用填料为羟基磷灰石的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体。方法经protein A为填料的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体后,通过Do E实验设计,对填料为羟基磷灰石的层析柱的洗脱流速、p H值及盐浓度进行优化,确定最佳洗脱条件后,进行抗TNF-α单克隆抗体的纯化,纯化产物经HPLC及毛细管电泳法检测其浓度、多聚体含量及纯度。结果抗TNF-α单克隆抗体经protein A层析纯化后,回收率达96.1%,纯度为96.0%,多聚体含量下降至1.9%。通过Do E优化,筛选出最佳条件范围为：流速1-3 ml/min,0.25-0.30 mol/L Na Cl,p H 7.0-7.3,选定1 ml/min流速、0.25 mol/L Na Cl、p H 7.0、作为洗脱条件进行纯化,回收率为93.1%,纯度为97.3%,多聚体含量为0,优于参比制剂。结论将羟基磷灰石用于抗TNF-α单克隆抗体的中度纯化,获得符合参比制剂质量的产品。

主 题 词：羟基磷灰石 肿瘤坏死因子-α 单克隆抗体 纯化 

学科分类：081704[081704] 07[理学] 08[工学] 070302[070302] 0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 0817[工学-轻工类] 100102[100102] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 10[医学] 

D　O　I：10.13200/j.cnki.cjb.001176

馆 藏 号：203152007...