检测乙型肝炎病毒“a”决定簇热点突变基因芯片的制备和初步应用

作     者：张瑞 李荣成 李艳萍 王升启 梁争论 李河民 庄辉 ZHANG Rui;LI Rong-cheng;LI Yan-ping;WANG Sheng-qi;LIANG Zheng-lun;LI He-min;ZHUANG Hui

作者机构：中国药品生物制品检定所北京100050 广西壮族自治区疾病预控制中心 军事医学科学院 北京大学医学部 

基　　金：国家“十五”科技攻关资助项目(2004BA718802) 

出 版 物：《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)

年 卷 期：2007年第15卷第2期

页      码：103-106页

摘      要：目的为快速、高通量检测HBV“a”决定簇热点突变，制备基因芯片，并进行了初步应用。方法应用HBV基因保守序列设计PCR扩增引物，针对“a”决定簇突变设计简并探针，制备了检测126A、126S、144A、145R、145E、144A＋145R和144A＋145E突变的基因芯片。通过对质粒参考品或样本进行测定，以评价芯片的特异性、灵敏度、重复性和检测劣势株的能力，并对45例乙型肝炎患者的血清样本同时应用基因芯片和PCR产物直接测序法进行检测比较。结果所制备的基因芯片能特异性检测出质粒参考品，灵敏度为5×10^3拷贝／μl。同一样本检测10次，芯片内和芯片间变异系数均小于15％。当劣势株占HBV毒株10％以上时，基因芯片即可检出。芯片法测得45例样本中126A、126S-1和126S-2的阳性率（分别为46．67％、35．56％和24．44％）显著高于PCR产物直接测序法（分别为9．00％、4．44％和2．22％;P值分别为0．000、0．000和0．002），克隆测序验证了基因芯片法的特异性。结论基因芯片法可快速、有效地检测HBV特定位点突变株，为HBV突变的大规模筛查提供了方法。

主 题 词：肝炎病毒 乙型 基因芯片 突变 “a”决定簇 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j.issn:1007-3418.2007.02.006

馆 藏 号：203153155...