pIRES2-EGFP-mGM质粒的构建及其在GM-CSF基因修饰性肿瘤疫苗中的应用

作     者：马明全 姜宏景 李慧 于津浦 魏枫 任秀宝 MA Ming-quan;JIANG Hong-jing;LI Hui;YU Jin-pu;WEI Feng;REN Xiu-bao

作者机构：天津医科大学肿瘤医院食管肿瘤科天津300060 天津医科大学肿瘤医院免疫学研究室天津300060 

出 版 物：《天津医科大学学报》 (Journal of Tianjin Medical University)

年 卷 期：2007年第13卷第1期

页      码：65-68页

摘      要：目的:构建一个含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因,并能够用于鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)基因修饰性肿瘤疫苗研究的质粒载体。方法:利用常规分子生物学方法设计并构建含有一个mGM-CSF基因和一个EGFP基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM质粒,经EcoR I及BamH I双酶切鉴定并测序。通过脂质体法转染LA795肺癌细胞,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达,用ELISA法检测细胞中mGM-CSF的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM,用脂质体法转染LA795肺癌细胞后,经荧光显微镜和ELISA法检测,可见细胞内有EGFP及mGM-CSF的表达。结论:成功地构建真核表达载体pIRES2-EGFP-mGM,并在LA795肺癌细胞中表达,为研究GM-CSF对肿瘤的生物学作用以及GM-CSF在基因修饰性肿瘤疫苗中的应用奠定了基础。

主 题 词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 肿瘤疫苗 巢式PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 100214[100214] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-8147.2007.01.022

馆 藏 号：203153158...