HER4基因siRNA载体的构建及其沉默作用

作     者：李新宇 逄旭光 葛棣 宁艳霞 曾亮 LI Xin-yu;PANG Xu-guang;GE Di;NING Yan-xia;ZENG Liang

作者机构：福建医科大学附属泉州第一医院肿瘤外科泉州362000 复旦大学附属中山医院胸外科上海200032 复旦大学上海医学院生理与病理生理学系上海200032 

基　　金：福建省科技项目计划(2008J0311) 

出 版 物：《医学研究生学报》 (Journal of Medical Postgraduates)

年 卷 期：2010年第23卷第1期

页      码：30-34页

摘      要：目的RNA干扰是由双链RNA引发的转录后基因沉默。为了研究表皮生长因子受体对食管癌细胞的作用,文中构建针对人HER4基因的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,转染人食管癌细胞Eca-109,观察其基因沉默效果,探索食管癌基因治疗的新途径。方法根据siRNA设计原则,设计针对HER4基因的两条寡核苷酸链,退火后与载体***+gfp连接,然后进行酶切鉴定和DNA序列测定。用脂质体包裹转染食管癌细胞Eca-109,用荧光定量PCR和Western blot方法检测HER4蛋白表达情况。结果经酶切鉴定和DNA测序分析后,提示HER4靶向RNA干扰重组载体构建成功。转染食管癌细胞后,用荧光定量PCR和Western blot法检测HER4基因表达水平显著降低。结论成功地构建了针对人HER4基因的siRNA表达载体,并可有效抑制食管癌细胞Eca-109中该基因的表达。

主 题 词：HER4 RNA干扰 食管癌 细胞 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-8199.2010.01.009

馆 藏 号：203153266...