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航天搭载紫花苜蓿SSR-PCR反应体系的优化以及引物的筛选

航天搭载紫花苜蓿SSR-PCR反应体系的优化以及引物的筛选

作     者:范润钧 陈本建 邓波 柴小琴 张蕴薇 

作者机构:甘肃农业大学草业学院甘肃兰州730070 中国农业大学动物科技学院草业科学系北京100193 甘肃省天水市农科所甘肃天水741000 

基  金:"十一五"国家科技支撑项目"牧草多因素诱变育种及聚合选育技术研究"(2008BADB3B04)资助 

出 版 物:《草原与草坪》 (Grassland and Turf)

年 卷 期:2010年第30卷第2期

页      码:22-26,32页

摘      要:航天育种的变异频率高、变异幅度大、有益变异多、稳定性强,优势明显。依据正交试验设计原理,设计了用正交试验和细调正交试验来确定航天搭载紫花苜蓿SSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Pri mers、Mg2+4种因素对航天搭载紫花苜蓿SSR-PCR反应体系进行了优化,得到适合航天搭载紫花苜蓿SSR-PCR最佳反应体系,即25μL的反应体系中含有dNTP 0.2 mmol/L、TaqDNA聚合酶2U、引物0.7μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L、以及10×buffer和60 ng模板DNA。在试验确定最佳反应体系基础上,对17对SSR引物进行筛选,选出6对扩增条带信号强、背景清晰的引物。

主 题 词:航天搭载紫花苜蓿 SSR标记 正交试验 体系优化 引物 

学科分类:090503[090503] 0909[0909] 0905[农学-林学类] 09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.1009-5500.2010.02.004

馆 藏 号:203153275...

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