FASN靶向miRNA干扰质粒的构建及鉴定

作     者：曾会龙 罗庆丰 刘志礼 詹名花 张志宏 陈文昭 龙新华 

作者机构：江西省吉水县中医院331600 江西省肿瘤医院病理科330029 南昌大学第一附属医院骨科330006 江西省靖安县妇幼保健医院330600 

基　　金：国家自然科学基金(编号:81260400) 江西省自然科学基金项目(编号:20114BAB205093) 

出 版 物：《实用癌症杂志》 (The Practical Journal of Cancer)

年 卷 期：2013年第28卷第5期

页      码：457-459页

摘      要：目的构建靶向FASN基因的miRNA表达质粒。方法根据NCBI查询到的FASN cDNA序列设计并合成靶向FASN的寡聚核苷酸序列,连接到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体中构建重组质粒(分别命名为X197-1、2、3、4)。重组质粒与脂质体2000共转染人骨肉瘤U2-OS细胞,倒置荧光显微镜下观察荧光率。采用RT-PCR和Western blot法检测重组质粒对FASN的mRNA及蛋白表达的影响。结果质粒(X197-1、X197-2)转染U2-OS骨肉瘤细胞后荧光率高于50%。4种质粒均能抑制FASN表达,其中X197-1、X197-4抑制作用显著。结论靶向FASN基因的miRNA质粒构建成功。

主 题 词：脂肪酸合成酶 RNA干扰 骨肉瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-5930.2013.05.001

馆 藏 号：203153436...