转基因油菜W-4 T-DNA旁侧序列分析与事件特异性检测

作     者：申爱娟 陈松 周晓婴 戚存扣 SHEN Ai-juan;CHEN Song;ZHOU Xiao-ying;QI Cun-kou

作者机构：南京农业大学农学院江苏南京210095 国家油料作物改良中心南京油菜分中心江苏南京210014 农业部长江下游棉花与油菜重点实验室江苏南京210014 

基　　金：江苏省农业科技支撑计划项目(BE2009304) 国家油菜产业技术体系(CARS-13) 农业部"948"重大专项(2011-G23) 

出 版 物：《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2014年第30卷第1期

页      码：14-20页

摘      要：W-4是通过农杆菌介导法将fad2基因的反向重复序列表达框转入甘蓝型油菜Westar后获得的转基因高油酸油菜品系。本研究应用温度不对称PCR(TAIL-PCR)技术扩增获得转基因油菜W-4的T-DNA插入位点的左、右旁侧序列。其中右边界旁侧序列长度为290 bp,其碱基组成G+C含量为31.27%、A+T含量为68.73%;左边界旁侧序列长度为365 bp,其碱基组成G+C含量为32.6%、A+T含量为67.4%,表明该T-DNA整合在富含A/T区。依据左、右边界旁侧序列和转基因载体的T-DNA左右边界序列设计的2对特异性引物TLF/TLR和TRF/TRR,能从W-4基因组DNA中扩增出大小分别为485 bp和405 bp预期产物,而在其他转基因油菜、非转基因油菜的基因组DNA和空白对照中均无特异性扩增产物,据此建立了W-4的转基因事件特异性PCR检测技术。应用该检测技术可以从含有0.1%W-4基因组DNA的混合样品中扩增出特异产物,检测灵敏度达到0.1%。表明应用该技术可对W-4转基因事件进行特异性检测。

主 题 词：转基因油菜 旁侧序列 事件特异性检测 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-4440.2014.01.003

馆 藏 号：203153464...