副猪嗜血杆菌hhdA克隆、抗原表位预测和表达

作     者：曾文斌 刘悦欣 谢巧 聂小伟 黄冬艳 王萍 ZENG Wen-bin;LIU Yue-xin;XIE Qiao;NIE Xiao-wei;HUANG Dong-yan;WANG Ping

作者机构：江西农业大学动物科学技术学院江西南昌330045 江西省家畜血防站江西南昌330046 

基　　金：江西省科技厅科技支撑计划(2009BNA0700) 江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ12239) 

出 版 物：《江西农业大学学报》 (Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis)

年 卷 期：2015年第37卷第3期

页      码：512-516,563页

摘      要：根据Gen Bank中的副猪嗜血杆菌hhd A的基因序列,设计并合成l对特异性引物,对从江西分离的HPS的hhd A基因进行扩增、克隆、测序、生物信息学分析和原核表达。测序结果表明,扩增的目的基因大小为1 797bp,共编码氨基酸599个氨基酸。与Gen Bank上公布的ZJ0906株(CP005384.1)中对应的核苷酸序列同源性为99.8%,氨基酸同源性99.6%。生物信息学分析表明,HPS hhd A蛋白是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β转角和无规则卷曲;综合柔性区域、亲水性位点、抗原指数和表面可能位点预测了hhd A蛋白可能的B细胞抗原表位的优势表位。将目的基因转入原核表达载体p ET-32a(+)构建重组原核表达质粒p ET-32a(+)-hhd A,将重组质粒转化到BL21(DE3)中,进行IPTG诱导表达,经过SDS-PAGE电泳结果显示表达的融合蛋白约80 k D。为进一步研究HPS hhd A生物学功能及抗体制备和开发hhd A基因工程产品奠定了基础。

主 题 词：副猪嗜血杆菌 hhdA 克隆 抗原表位 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13836/j.jjau.2015079

馆 藏 号：203154036...