小鼠Cdc25B融合蛋白构建和表达

作     者：赵鸿梅 滕秋艳 张哲 于秉治 

作者机构：辽宁省人民医院检验科沈阳110016 中国医科大学生化与分子生物学教研室 

基　　金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助(20050159019) 

出 版 物：《中国公共卫生》 (Chinese Journal of Public Health)

年 卷 期：2007年第23卷第8期

页      码：976-977页

摘      要：目的研究小鼠N末端缺失286氨基酸的野生型Cdc25B原核表达载体的构建和表达。方法应用Primer5.0软件分析并设计小鼠Cdc25B5′及3′端引物(N末端缺失286氨基酶),化学合成并用聚合酶链反就(PCR)方法扩增,经限制性内切酶酶切后连接原核表达载体PGEX4T-2,构建成PGEX4T-2-Cdc25B融合表达载体,转化大肠埃希菌BL21后,通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导进行目的蛋白表达。结果通过双酶切、电泳分析及测序证明成功构建了Cdc25B融合表达载体,融合蛋白产物经蛋白印迹(Westernblot)显示,相对分子量为53KD的蛋白谱带,与预期一致。结论成功构建并表达了Cdc25B-N末端缺失的基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为近一步研究Cdc25B的功能提供基础依据。

主 题 词：Cdc25B 基因表达 谷胱甘肽转移酶(GST) 聚合酶链式反应 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1001-0580.2007.08.037

馆 藏 号：203154701...