库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAi载体构建及烟草遗传转化

作     者：李诗林 郑银英 崔百明 都业娟 乔亚红 田桂英 向本春 LI Shilin;ZHENG Yinying;CUI Baiming;DU Yejuan;QIAO Yahong;TIAN Guiying;XIANG Benchun

作者机构：石河子大学农业生物技术重点实验室/石河子大学生命科学学院石河子832003 

基　　金：国家自然科学基金项目(30860168) 

出 版 物：《石河子大学学报（自然科学版）》 (Journal of Shihezi University(Natural Science))

年 卷 期：2012年第30卷第4期

页      码：422-428页

摘      要：为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5’端序列377bp(PCR-CLA)和MP基因3’端序列354bp(PCR-CLB)作为靶标基因。以植物表达载体pBi35SG12为骨架载体,卡那霉素抗性基因为筛选基因,将靶标基因的正向序列和反向重复序列分别插入到内含子(intron)的两侧,构建RNAi载体pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,利用农杆菌介导的方法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),通过对各载体的干扰效果评价来分析各基因的主要功能。通过PCR检测pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,结果表明已分别获得27株和24株转基因植株。本研究为进一步评价各载体的干扰效果和研究ACLSV主要基因的功能奠定了基础。

主 题 词：苹果褪绿叶斑病毒 克隆 RNAi载体 遗传转化 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-7383.2012.04.006

馆 藏 号：203154933...