羊溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌双重PCR鉴别检测方法的建立与应用

作     者：张峰源 夏贵泉 孟卫芹 邓凤林 王金良 刘建钗 Zhang Fengyuan;Xia Guiquan;Meng Weiqin;Deng Fenglin;Wang Jinliang;Liu Jianchai

作者机构：河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056000 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 深圳市康百得生物科技有限公司广东深圳518000 

基　　金：山东省羊产业技术体系岗位专家项目(SDAIT-10-06) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2024年第41卷第10期

页      码：102-106页

摘      要：溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)和多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是两种条件性致病菌,可导致多种临床症状,给羊产业造成一定经济损失。为临床上快速、准确地鉴别诊断这两种细菌所导致的疾病,根据Mh的Lkt基因和Pm的kmt基因分别设计引物,建立了在一个反应体系中同时鉴别检测这2种细菌的PCR方法。结果显示:建立的PCR鉴别检测方法对Mh、Pm基因组DNA的检测限分别为7.23×10^(-6)、6.99×10^(-5) ng/μL,对羊链球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、羊支原体核酸检测均为阴性,在多次重复试验中均可检测出阳性样品,其反应试剂均扩增出预期大小的片段。对95份羊源疑似临床样品进行检测,Mh检出率为38.95%(37/95),Pm检出率为53.68%(51/95),混合感染检出率为12.63%(12/95),鉴别检测结果与单重PCR检测结果基本一致。结果表明:该方法具有较好的特异性、敏感性、重复性及稳定性,可用于临床检测,为羊呼吸道疾病的鉴别诊断提供了一种方便、快捷和准确的检测手段,具有良好的临床应用前景。

主 题 词：溶血性曼氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 PCR 羊 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2024.10.018

馆 藏 号：203154996...