利用CRISPR/Cas9技术构建ACBD3基因敲除Hela细胞系

作     者：冯晓楠 贾天军 FENG Xiao-nan;JIA Tian-jun

作者机构：河北北方学院临床检验诊断学重点实验室河北张家口075000 

基　　金：河北省自然科学基金项目(C2020405014) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第45卷第12期

页      码：32-38页

摘      要：利用CRISPR/Cas9技术敲除Hela细胞的乙酰辅酶A结合结构域3(ACBD3),构建ACBD3基因敲除的Hela细胞系,便于后续研究ACBD3对肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)生长发育的影响及相关信号通路。根据CRISPR/Cas9设计原则,设计向导RNA(sgRNA),将sgRNA与Cas9蛋白即RNP复合物通过电转染至Hela细胞,挑取单克隆细胞进行培养鉴定,利用Western blot和免疫荧光法检测ACBD3蛋白表达情况。测序显示成功构建敲除细胞株,Western blot和免疫荧光结果显示ACBD3蛋白不表达。利用CRISPR/Cas9技术成功构建ACBD3基因敲除的Hela细胞系,为进一步研究该基因对Cpn生长发育的作用及相关信号通路奠定了基础。

主 题 词：CRISPR/Cas9技术 ACBD3基因 Hela细胞 基因敲除 肺炎衣原体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2024.12.006

馆 藏 号：203155645...