心肌缺血再灌注损伤中内质网应激与巨噬细胞极化的相关性研究

作     者：刘新磊 冯旭 罗程 黎玉贵 蔡雄伟 谢晓勇 Liu Xinlei;Feng Xu;Luo Cheng;Li Yugui;Cai Xiongwei;Xie Xiaoyong

作者机构：广西医科大学第一附属医院心胸外科南宁530021 

基　　金：国家临床重点专科建设项目 广西医疗卫生重点学科建设项目 广西壮族自治区临床重点专科建设项目 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2024年第41卷第11期

页      码：2551-2555页

摘      要：目的:探究在心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中内质网应激(ERS)与巨噬细胞极化的相关性。方法:广西医科大学实验动物中心提供的C57BL/6小鼠,20~40 g,20只(雌雄各半),使用随机数表法分为4组,每组5只,假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)、衣霉素+I/R组(TM+I/R组)、4-苯基丁酸+I/R组(4-PBA+I/R组)。Sham组单纯开胸后垫高冠状动脉;I/R组结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注2.5 h;TM+I/R组及4-PBA+I/R组,分别腹腔注射TM及4-PBA,结扎左前降支30 min,再灌注2.5 h。流式细胞术检测巨噬细胞募集数量;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织、免疫组织化学法观察心肌细胞形态;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测心肌ERS标记蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、巨噬细胞极化标记蛋白诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及核因子-κB(NF-κB)通路标记蛋白p65的蛋白表达量。组间比较采用完全随机设计双样本t检验。结果:流式细胞术结果,4-PBA+I/R组(0.192±0.019)、I/R组(0.308±0.043)和TM+I/R组(13.112±0.462)巨噬细胞募集数目均高于Sham组(0.116±0.03,t=8.835、9.928、62.941,P均<0.05),4-PBA+I/R组低于I/R组(t=-13.485,P<0.05),而TM+I/R组则高于I/R组(t=62.011,P<0.05)。心肌ERS标记蛋白GRP78、巨噬细胞极化标记蛋白iNOS免疫组织化学,Sham组为[(9.3±3.2)%、(7.6±3.9)%,P<0.05]心肌组织染色出现弱阳性细胞质染色;4-PBA+I/R组为[(18.4±2.4)%、(22.3±2.1)%,P<0.05]出现弱阳性细胞质染色;I/R组为[(46.0±1.3)%、(33.6±4.9)%,P<0.05]出现阳性的细胞质染色,TM+I/R组为[(76.2±9.3)%、(79.3±5.2)%,P<0.05]出现强阳性细胞质染色。Western blot结果显示4-PBA+I/R组、I/R组和TM+I/R组GRP78、iNOS、p65蛋白表达量高于Sham组(t=1.298、3.934、6.128,P<0.01),4组GRP78蛋白表达量分别为0.716±0.305、0.308±0.043、1.589±0.349、0.518±0.141、4组iNOS蛋白表达量分别为0.416±0.207、0.748±0.274、1.323±0.298、0.223±0.132、4组p65蛋白表达量分别为0.687±0.214、1.101±0.496、1.697±0.959、1.697±0.959,4-PBA+I/R组蛋白表达(0.716±0.305、0.416±0.207、0.687±0.214)均低于I/R组分别为:(0.308±0.043、0.748±0.274、1.101±0.496,t=-13.485,P<0.01),TM+I/R组蛋白表达(1.589±0.349、1.323±0.298、1.697±0.959)均高于I/R组(0.308±0.043、0.748±0.274、1.101±0.496,t=62.011,P<0.01);GRP78与iNOS蛋白表达具有正相关性[相关系数(r^(1))=0.998,P<0.01];p65、GRP78与iNOS蛋白表达具有正相关性[相关系数(r^(2))=0.989,(r^(3))=0.978,P<0.01]。结论:在MIRI中,ERS和M1型巨噬细胞,两者具有正相关性,ERS是巨噬细胞极化重要调节因子;心肌ERS可能是通过NF-κB p65来调节巨噬细胞极化。

主 题 词：心肌缺血再灌注损伤 内质网应激 巨噬细胞M1极化 葡萄糖调节蛋白78 核因子-κB 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.cn421213-20240417-01072

馆 藏 号：203155991...