FLT3靶向短发夹状干扰RNA体外转录合成及作用

作     者：卢洁 盛光耀 邹湘 方营旗 赵晓明 徐学聚 白松婷 许培荣 王建人 LU Jie;SHENG Guang-Yao;ZOU Xiang;FANG Ying-Qi;ZHAO Xiao-Min;XU Xue-Ju;BAI Song-Ting;XU Bai-Rong;WANG Jian-Ren

作者机构：郑州大学第一附属医院儿科郑州450052 郑州大学细胞生物工程研究室郑州450052 河南中医学院生理教研室郑州450003 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2007年第15卷第4期

页      码：839-844页

摘      要：FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)是一种酪氨酸激酶受体,在大多数急性髓系白血病(AML)患者中持续激活,与患者预后差密切相关。为探讨3种FLT3靶向短发夹状干扰RNA(shRNA)对急性髓系白血病细胞株THP-1的沉默效应,设计和体外转录合成3个FLT3靶向shRNA(shRNA1、shRNA2、shRNA3),体外转染THP-1细胞;以RT-PCR法检测FLT3mRNA水平表达,用流式细胞术、免疫荧光测定法检测FLT3蛋白的表达。结果显示:shRNA1、shRNA3可显著下调FLT3mRNA的表达,其中shRNA1的抑制作用较强。25nmol/LshRNA1转染48小时对FLT3mRNA的抑制率是(72.95±2.07)%,作用可达72小时。5nmol/L及以上浓度的shRNA1对FLT3mRNA表达有下调作用,作用存在量-效关系。15nmol/LshRNA1的抑制率是(67.53±0.66)%。FLT3蛋白位于细胞膜上,shRNA1对其有较强的抑制作用,转染72小时蛋白抑制率达(79.67±0.66)%。结论:FLT3-shRNA1具有较好的FLT3基因靶向抑制作用,可作为进一步研究该基因作用机制及靶向治疗可能性的工具。

主 题 词：急性髓系白血病 FLT3 FLT3-shRNA RNA干扰 THP-1细胞株 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-2137.2007.04.035

馆 藏 号：203156243...