非洲马瘟病毒和西尼罗病毒双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

作     者：钱佳豪 刘丹 周师众 张博源 高建帅 蒋卉 范学政 张广智 丁家波 王春凤 沈青春 QIAN Jiahao;LIU Dan;ZHOU Shizhong;ZHANG Boyuan;GAO Jianshuai;JIANG Hui;FAN Xuezheng;ZHANG Guangzhi;DING Jiabo;WANG Chunfeng;SHEN Qingchun

作者机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方)北京100193 吉林农业大学动物医学院长春130118 

基　　金：外来动物疫病传入溯源精准诊断技术与产品研究(2022YFD1800503) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2024年第55卷第12期

页      码：5873-5879页

摘      要：本研究旨在建立一种可同时检测非洲马瘟病毒(African horse sickness virus,AHSV)和西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)的双重荧光定量RT-PCR检测方法。根据AHSV VP 7基因序列和WNV Poly Protein基因的高度保守区域设计特异性引物和探针,优化反应条件及体系,绘制标准曲线,对其特异性、敏感性和重复性进行测定,并采用该方法对临床样品进行检测验证。结果显示:该方法能够同时检测AHSV和WNV,且特异性良好,与马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马传染性贫血病毒、马腺疫链球菌、马流感病毒等马病核酸均无交叉反应;敏感性高,AHSV和WNV最低检测限均为10 copies·μL^(-1);组内变异系数为0.04%~0.93%,组间变异系数为0.17%~4.83%,重复性良好;使用该方法对30份马全血样品进行检测,结果均为阴性。本试验建立的检测方法对马属动物检疫、非洲马瘟和西尼罗热的监测与防控具有重要意义。

主 题 词：双重荧光定量RT-PCR 非洲马瘟病毒 西尼罗病毒 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2024.12.048

馆 藏 号：203156323...